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詳解黃曲霉毒素親和柱的分析步驟

更新時(shí)間：2022-05-26 點(diǎn)擊次數(shù)：1629

　　黃曲霉毒素親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2。黃曲霉毒素免疫親和柱廣泛地應(yīng)用于糧食、食品、飼料、堅(jiān)果、花生、醬油、醋、辣椒、胡椒、藥材和酒類(lèi)等樣品的提取，該方法速度快、操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確性高，對(duì)準(zhǔn)確靈敏的測(cè)定樣品中的黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2起到十分重要的作用。

　　原理：樣品經(jīng)甲醇+水提取液提取、過(guò)濾、稀釋?zhuān)缓笸ㄟ^(guò)鍵合有黃曲霉毒素特殊抗體的免疫親和柱。此時(shí)，黃曲霉毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質(zhì)除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將黃曲霉毒素從親和柱上洗脫下來(lái)。用HPLC或熒光計(jì)進(jìn)行定量檢測(cè)。

　　黃曲霉毒素親和柱分析步驟：

　　1.樣品提取及稀釋?zhuān)?/div>

　　大米、玉米、小麥、堅(jiān)果、調(diào)料、花生及其制品：準(zhǔn)確稱(chēng)取試樣25.0g于250mL具塞錐形瓶中，加入5.0g氯化鈉及準(zhǔn)確加入125.0mL甲醇-水（7+3），以均質(zhì)器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙過(guò)濾，準(zhǔn)確移取15.0mL濾液并加入30.0mL水稀釋?zhuān)貌ＡЮw維濾紙過(guò)濾，至濾液澄清，備用。

　　植物油脂：準(zhǔn)確稱(chēng)取試樣25.0g于250mL具塞錐形瓶中，加入5.0g氯化鈉及入125.0mL甲醇-水（7+3），以均質(zhì)器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙過(guò)濾，準(zhǔn)確移取15.0mL濾液并加入30.0mL水稀釋?zhuān)貌ＡЮw維濾紙過(guò)濾，至濾液澄清，備用。

　　醬油：稱(chēng)取試樣50.0g于250.0mL具塞錐形瓶中，加入2.5g氯化鈉及加入甲醇-水（8+2）至100.0mL，以均質(zhì)器高速攪拌提取1min。槽紋濾紙過(guò)濾，準(zhǔn)確移取10.0mL濾液并加入40.0mL水稀釋?zhuān)貌ＡЮw維濾紙過(guò)濾，至濾液澄清，備用。

　　2.樣品的凈化

　　黃曲霉毒素總量免疫親和柱的柱容量(吸附黃曲霉毒素量)為300ng，當(dāng)樣品中黃曲霉毒素超過(guò)測(cè)定范圍時(shí)，請(qǐng)適當(dāng)減小上柱體積，使其在檢測(cè)范圍內(nèi)，計(jì)算出含量。